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      產品/Product
      EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS(for microRNA)(microRNA一步法試劑盒)
      發布時間: 2019-01-31 15:49:39 | 次瀏覽



      產品名稱 品牌 貨號 規格 目錄價
      EZ-press SINGLE Cell to cDNA Kit
      (單細胞到cDNA一步法試劑盒)
      EZBioscience B0011 100 Rxns 3200
      EZ-press Cell to cDNA Kit
      (細胞到cDNA一步法試劑盒)
      EZBioscience B0001 100 Rxns 3000
      EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS
      (細胞到cDNA一步法升級試劑盒)
      EZBioscience B0003 100 Rxns 3300
      EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS(for microRNA) EZBioscience EZB-miRT1 50 Rxns 4000



      EZ-press Cell to cDNA Kit PLUSfor microRNA
         
      (microRNA一步法試劑盒)
       

       
      Cat. No.: EZB-miRT1
       
      一、試劑盒簡介
              本試劑盒是簡單快速從細胞到cDNA的一步法試劑盒,無需復雜的microRNA提取步驟,試劑盒中含有gDNA Remover可有效去除基因組DNA,極大降低了基因組DNA的污染。具體過程是:根據細胞數,按照80 µl /10萬細胞的量加Cell Lysis Buffer,吹吸10次,充分裂解細胞;吸出4 - 8 µl細胞裂解產物,加入0.8 µl gDNA Remover,室溫反應5 min,即可去除基因組DNA。然后配制逆轉錄體系,充分混勻后,只需37℃反應15 min 、42℃反應10 min即可得到對應細胞內所有microRNA的cDNA。
       
       
      二、產品組分

      Component EZB-miRT1
      (50 Rxns)
      Cell Lysis Buffer 11 ml
      gDNA Remover 50 μl
      miRNA RT Enzyme Mix 110 μl
      4× miRNA RT Buffer 275 μl
      Universal 3’ qPCR Primer (10 μM) 750 μl
      U6 Primer (10 μM ) 150 μl
      Nuclease free ddH2O 1      ml
       
      三、保存條件
      此試劑盒建議置于-20℃冰箱中保存。
       
      四、試劑盒特點
      1、簡單、快速: 僅需4步大約28 min即可得到對應細胞內所有microRNA的cDNA。
      2、基因組殘留少:配有gDNA Remover,可有效去除DNA污染。
      3、所需樣品少:最低可提取1000個細胞。
      3、 安全無毒:不使用苯酚、氯仿、異丙醇、DEPC水等對身體有害的物質。
       
      五、注意事項
      1、本試劑盒是專為qPCR設計的,盡量不要用于基因克隆。
      2、建議用24、48或96孔板培養細胞。細胞密度達到80%為最佳。
      3、細胞從培養箱中取出后建議放在室溫,切勿放在冰上,以免影響細胞狀態。
      4、初次使用時建議對細胞進行計數,之后可參考細胞估數圖進行估數。
      5、Cell Lysis Buffer解凍后,需顛倒幾次使之充分混勻,再放在冰上以備使用,請勿渦旋振蕩。
      6、本試劑盒是根據細胞來加裂解液,裂解液最少應該能夠充分覆蓋培養孔底部,否則過少容易導致吹出泡沫,或者裂解不充分。
      7、gDNA Remover 和4× RT Mix在使用前都要上下顛倒混勻,短暫離心至管底。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取時應慢慢吸取。同時,要使用精確、量程適合的移液槍,并且不要使Tip插入液面過深,否則會因Tip壁粘著造成損失,而使酶量不足。
      8、當同時需要進行數次反應時,應先配制各種試劑的混合液,然后再分裝到每個反應管中。這樣可使所取的試劑體積更準確,減少試劑損失,避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或實驗之間產生的誤差。
       
       
      備注:PDF版英文說明書請在“技術資料”---“說明書下載”欄目中下載。

       

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