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      產品/Product
      2×SYBR Green qPCR Mix(預混ROX2)
      發布時間: 2018-11-18 16:30:12 | 次瀏覽


      產品名稱 品牌 貨號 規格 目錄價
      2×SYBR Green qPCR Mix
      (ROX獨立包裝)
      EZBioscience A0001 5 ml 1000
      2×SYBR Green qPCR Mix
      (預混ROX1)
      EZBioscience A0001-R1 5 ml 1000
      2×SYBR Green qPCR Mix
      (預混ROX2)
      EZBioscience A0001-R2 5 ml 1000
      2×SYBR Green Color qPCR Mix(彩色qPCR試劑盒) EZBioscience A0012 5 ml 1200

      2×SYBR Green qPCR Master Mix ( ROX2 plus)
       

      Cat. No.: A0001-R2
       
      一、試劑盒簡介
              本試劑盒采用了具有超強擴增能力和抗干擾能力的熱啟動DNA聚合酶,結合其高度優化的緩沖液體系和染料系統,使之具備了更強的擴增效率、抗干擾能力,更高的靈敏度和特異性。具有起峰更早,在相同情況下得到的熒光信號更強,Ct值更小,熔解曲線特異性更高等特點。此外,為了進一步簡化操作,該試劑盒的2× SYBR Green qPCR mix預混了ROX2染料(low Rox),從而只需要將模板cDNA、引物以及 ddH2O添加進去,即可進行qPCR反應。
       
      二、產品組分

      Components A0001-R2 (500Rxns)
      2× SYBR Green qPCR Master Mix*1 5 ml
      *1:包含Hot-start DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+和Buffer,同時預混了ROX2,用于校正不同孔之間產生的熒光信號誤差。
       
      三、試劑保存條件
      本試劑建議置于-20℃避光保存。
       
      四、適用的儀器型號(如果儀器不在下表中,請用A0001-R1A0001):

      ABI 7500, 7500 Fast, Quanti-Studio 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™
      Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™;
      Cepheid SmartCycler®; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR;
      Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000;
      Roche LightCyclerTM 480;
      Thermo Scientific PikoReal Cycler.
       
      五、關于qPCR反應是否良好的判斷:
      1、如果擴增曲線呈典型的S型曲線,背景熒光信號階段、熒光指數擴增階段及平臺期均完整可見,熔解曲線單峰,內參Ct值在合理范圍內(通常可在13 ~ 22之間,典型的內參Ct值在15 ~ 20之間),則可認為該反應正常;
      2、如果同一個模板和引物的重復孔數據Ct值相差0.5以內;
      同時滿足以上兩個條件的可以認為數據可用。
       
      六、常見的注意事項、操作要點及優化方法:
      1、實驗開始前首先驗證引物是否適用,標準與上述標準類似,主要觀察擴增曲線與熔解曲線;
      2、引物驗證后應該分裝為幾份,防止污染或降解;
      3、RNA的質量及cDNA的質量對qPCR的結果具有很大的影響,應盡量保證RNA不降解,通常建議RNA提取后盡快進行逆轉錄,避免反復凍融,或者多次逆轉錄。如果預計使用量較大,則可以一次多逆轉幾管cDNA。如果條件允許,cDNA建議優先保存在-80℃冰箱。
       
      七、關于qPCR引物的設計:
      1、首先可以查詢Google Scholar中的文獻當中的引物,通常中等及以上水平期刊中的qPCR引物絕大多數可以直接使用;
      2、NCBI數據庫的Blast數據庫中的primer blast提供了針對序列或者Gene ID的qPCR引物設計方案,可以每個基因設計2對引物,并進行合成、驗證;
      3、Primer Bank數據庫中有部分已經驗證過的引物可用,也可作為參考。
       
       
      備注:PDF版英文說明書請在“技術資料”---“說明書下載”欄目中下載。
       




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